Biópsias

Informação Geral

Nos últimos 40 anos, as doenças neuromusculares têm recebido maior atenção nos países desenvolvidos graças à introdução de novas técnicas laboratoriais, melhorando a qualidade do diagnóstico dessas moléstias.
Com a introdução do método de biópsia muscular por congelação, o método por parafina deixou de ser fundamental, pois a primeira evita os artefatos anteriormente existentes e mantém, fielmente, a estrutura original do espécime analisado. Além disso, a congelação permite realizar diferentes colorações aumentando a probabilidade diagnóstica.

No que diz respeito às miopatias inflamatórias (miosites), a biópsia muscular continua sendo o padrão ouro para o diagnóstico acurado.

A biópsia de nervo ou neuromuscular (retirada simultânea de nervo e músculo) também realizada pela myogenética tem uma indicação mais restrita particularmente, nas suspeitas de moléstia de Hansen, doença inflamatória dos vasos, neoplasias e eventualmente, em doenças de depósito.

Realizamos cortes em parafina e cortes semi-finos que permitem uma avaliação mais detalhada das estruturas nervosas.

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Biópsia de músculo

Músculos possíveis de serem retirados:

Membros superiores: Bíceps braquial, deltoide, extensor dos dedos.

Membros inferiores: vasto lateral, tibial anterior, fibular, gastrocnêmio.

A escolha do músculo é muito importante. Não é recomendado a retirada de fragmento muscular de músculo com força muscular menor ou igual a 3 (escala MRC) devido a possível substituição do músculo por gordura, dificultando o processamento do material e o diagnóstico.

A eletroneuromiografia deve ser realizada 6 meses antes da realização da biópsia muscular a fim de evitar artefatos de agulha.

Técnica:
  1. Congelação em nitrogênio líquido a -80 graus e, em alguns casos, a inclusão em formol nos casos com suspeita de miopatia inflamatória.
  2. Colorações:Hematoxilina – Eosina, Tricomo de Gomori, PAS, ORO, NADH, SDH, COX, COX/SDH, ATPase 9.4, ATPase 4.63, ATPase 4.3, Fosfatase ácida, Fosfatase alcalina, Miofosforilase, Fosfofrutoquinase, Menadiona.

É importante o médico especificar no pedido se deseja colorações complementares como imunohistoquímica pois são especificas para determinados diagnósticos.

Por exemplo:

Miopatias inflamatórias: é essencial o perfil imunohistoquímico inflamatório: MHC classe 1, p62, CD4,CD8, CD68, C5b9.

Distrofias musculares ou miopatias inespecíficas: perfil imunohistoquímico para distrofias musculares: Disferlina, Alfa Sarcoglicano, Beta Sarcoglicano, Gama Sarcoglicano, Delta Sarcoglicano, Caveolina, Telotonina , Alfa distroglicano, Distrofina N, Distrofina C, Distrofina ROD e Laminina α2 (Merosina).

Exemplo de Biopsia de Músculo Diagnostico Miopatia Inflamatória Idiopática:
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HE: aumento de fibras com núcleos internalizados, infiltrado linfomononuclear endomisial; fibra não necrótica parcialmente invadida; vacuolos marginados

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Gomori: Tecido conjutivo normal
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Fosfatase ácida: fibras em necrose
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Fosfatase alcalina: raras fibras em regeneração
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ATPase 9.4: predomínio tipo 1
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ATPase 4.6: atrofia 2B
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ATPase 4.3: fibras 2C
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ORO
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PAS
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NADH
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SDH
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COX: fibras COX-negativa
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COX-SDH : fibras COX-negativas coradas em azul
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MHC classe 1: imunoexpressão positiva(patológico)
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C5b9: imunoexpressão positiva sarcolemal em raras fibras
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P62: imunoexpressão negativa(normal)
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CD4: imunoexpressão positiva linfócitos T
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CD8: imunoexpressão positiva linfócitos T
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CD68: imunoexpressão positiva em macrófagos
As imagens dessa páginas pertecem a Dra. Alzira Alves de Siqueira Carvalho - Não utilizar sem a devida autorização.

Biópsia de Nervo

Nervos possíveis de serem analisados: nervo sural e nervo fibular superficial
Na biópsia neuromuscular, utilizamos a técnica Fardeau: retirada de um fragmento de nervo (fibular superficial) e um fragmento de músculo (peroneiro curto) no mesmo corte.

Técnica:
  1. Inclusão em parafina.
    Colorações: hematoxilina-eosina, Masson, vermelho congo e Ziehl-Neelsen.
  2. Inclusão em resina (cortes semi-finos).
    Coloração: azul de toluidina.
Exemplo de Biópsia de Nervo:
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HE Parafina
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HE Parafina
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Masson Parafina
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Masson Parafina
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Vermelho Congo
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Ziehl-Nieelseen
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Cortes semi-fino de Nervo
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Corte semi-fino


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